武漢愛基百客生物科技有限公司
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酵母單雜交(Yeast One-Hybrid,Y1H)是用于研究DNA-蛋白質之間相互作用的技術??煽焖勹b定與特定調節DNA序列(bait序列)相互作用的蛋白質,除了找到轉錄因子,還可有獲得DNA復制蛋白、修復蛋白及抑制蛋白等相關蛋白。酵母單雜交還可檢測蛋白異構體(isoform)與DNA特異性相互作用。
技術原理
許多真核生物的轉錄因子由物理和功能上獨立的 DNA 結合區(DNA-bindingdomain BD)和轉錄激活區(Activation domain AD)組成,酵母單雜交體系的原理是將已知的特定順式作用元件構建到基本啟動子的上游,把報告基因連接到基本啟動子的下游。然后將編碼待測轉錄因子cDNA與已知酵母轉錄激活結構域融合表達載體導入酵母細胞,該基因如果能夠與順式作用元件相結合,就能激活基本啟動子,使報告基因得到表達。
技術流程
樣品要求
1、 組織或細胞
2、 promoter基因序列/質粒
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