武漢愛基百客生物科技有限公司
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常規轉錄組測序由于文庫存在PCR擴增偏好性,所有序列并不會被同比例放大,因而造成測序定量結果與樣本中轉錄本的原始豐度不一致,導致差異基因篩選不準確。這也是造成qPCR驗證測序結果不一致的主要原因。武漢愛基百客生物推出的絕對定量轉錄組測序消除PCR擴增偏好對定量的干擾,真實反映樣本中轉錄本的表達豐度。
技術原理
在文庫擴增之前為每一條RNA片段加上唯一的身份標簽(Unique Identifier,UID),同一片段擴增產物均帶有相同的標簽,而天然重復片段則帶有不同的標簽。測序完成后利用UID過濾數據,將相同標記的擴增產物進行合并,就能準確去除PCR擴增重復、同時保留樣本的天然重復,在此過程中,PCR擴增和測序錯誤同樣可以被糾正。
技術流程
樣品要求
1、 細胞樣本:3 X 10^6~1 X 10^7個
2、 動物組織:1-2g
3、 植物組織:3-4g(100mg左右分裝)
4、 RNA:請提供≥15μg,OD260/280=1.8~2.2,OD260/230≥2.0,濃度≥400ng/μl,28S:18S≥1.0,23S:16S≥1.5;
企業名稱:武漢愛基百客生物科技有限公司
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